Uso de técnicas de adsorción y elución para la identificación de anticuerpos anti-K y anti-Jka en una donadora sana. Reporte de caso

Introducción

Uno de los objetivos fundamentales de un banco de sangre es obtener y proporcionar productos bioseguros y suficientes para la población que los requiere, para lograr lo anterior se realizan diferentes pruebas a los donadores de sangre, dentro de estas se puede mencionar  al rastreo de anticuerpos irregulares (RAI) la cual es fundamental  ya que permite evidenciar en los donadores la presencia de anticuerpos irregulares clínicamente significativos. 

La frecuencia de aloinmunización tiende a variar entre pacientes y donantes siendo más baja en estos últimos. En población general se estima que entre el 0.78% al 1.64% desarrollan anticuerpos irregulares. Se ha reportado que entre el 0.5-0.8% de los donadores de sangre son positivos al realizar  rastreo de anticuerpos irregulares. En un estudio realizado con 6,543 donadores, el 0.12% se encontraron anticuerpos irregulares, los anticuerpos predominantes son anti E, anti S y anti M. 

En la mayoría de los donadores con RAI positivo se logra  identificar la especificidad del anticuerpo utilizando un panel de 10, 11 o 16 células con fenotipo conocido. La mayoría de las veces se encuentra presente un solo aloanticuerpo, lo que facilita su correcta identificación. Es poco común encontrar más de dos aloanticuerpos con un alto significado clínico, por lo que esto representa un reto para el servicio de inmunohematología, poder diferenciarlos de forma correcta, Existen varias técnicas que pueden contribuir para dicho fin, como el uso de enzimas, sin embargo, no siempre se cuenta con estas. Unas de las técnicas más socorridas son la adsorción y la elución, las cuales nos permiten poner de manifiesto la presencia de los anticuerpos que se estén enmascarando, estas dos técnicas son sencillas y de fácil aplicación. 

Objetivo

Utilizar técnicas de adsorción y elución para demostrar la presencia de una mezcla de anticuerpos en una donadora de sangre.

Método y materiales

Se utilizaron tarjetas DG Gel ABO/Rh (2D), DG Gel Rh Pheno, DG Gel Coombs, células Serascan Diana 2 y Serascan Diana Dia, panel Identisera de 11 células, marca Grifols, células del panel del Banco de Sangre del Centro Médico Nacional Siglo XXI (BSCMNSXXI), Gamma ELU-KIT^TM marca Immucor para realizar elución. El procesamiento de las muestras se realizó en equipos Erytra Eflexis, DG Spin y DG Therm marca Grifols.

Descripción del caso

Se reporta donante femenino, 2 gestas, 2 cesáreas, sin transfusiones previas. Los estudios indican que la donante es grupo “B” Rh(D) positivo, fenotipo R1r(Cece), prueba de antiglobulina directa negativa, rastreo de anticuerpos irregulares (RAI) negativo. Por medio de la técnica de adsorción y elución se pone de manifiesto la presencia de un anti-K y un anti-Jka.

Procesamiento en el laboratorio y resultados

Como parte del protocolo para donadores se realiza Grupo Sanguíneo ABO-RhD (Figura 1), fenotipo de Rh (Figura 2), Rastreo de Anticuerpos Irregulares, (Figura 3) y  Coombs directo. 

Al encontrarse positivo el Rastreo de Anticuerpos Irregulares, se procede a hacer una identificación de el o los anticuerpos presentes en la muestra. Los resultados se encuentran en la tabla 1.

Se detectó la presencia de dos anticuerpos irregulares con alto interés clínico, ambos hasta la fase de Coombs. Para ello se utilizó un panel de 11 células en donde se observa la presencia de una mezcla de anticuerpos por los diferentes grados de aglutinación, esto debido al carácter homocigoto y heterocigoto de los eritrocitos que la integran el panel como lo muestra la imagen del panel

(Figura 5). 

Posteriormente se procedió a separar los anticuerpos presentes y demostrar su especificidad, para esto se utilizó la técnica de adsorción tomando eritrocitos que integran el panel del BSCMNSXXI (IX-2024). Los eritrocitos seleccionados cumplían la característica de ser complementarios para los antígenos K y Jka, ya que se sospecha que sus correspondientes anticuerpos son los que se encuentran en la mezcla, ver tabla 2.

Con los sueros adsortos se corrieron 3 paneles, lo que permitió determinar la especificidad de estos dos anticuerpos,   en el caso del probable anti-Jka, la identificación no fue tan clara debido a que los eritrocitos tenían el carácter heterocigoto (Jka+, Jkb+) y la aglutinación observada es débil o negativa como se ve reflejado en la imagen del panel (Figura 6). En el caso del anti-K la imagen es muy clara (Figura 7).

Discusión

Se comprueba que se trata efectivamente de un anti-Jka porque se realiza una nueva adsorción como lo indica el diagrama (Figura 10), seguido de la técnica de elución para el estudio de anticuerpos, utilizando la técnica de EDTA-glicina ácida como medio de reacción, con el eluído se corrió el panel, confirmando la presencia del anticuerpo anti-Jka (figura 9). Por lo tanto, los anticuerpos detectados fueron el anti-K y el anti-Jka. Esta mezcla de anticuerpos no es muy común de observar en donadores o en pacientes sensibilizados. Se sabe que los anticuerpos mayormente reportados en población mexicana pertenecen al sistema Rh siendo anti-E el más común, seguido del anti-K y en la quinta posición el anti-Jka , de acuerdo con lo reportado en la revista de la Asociación Mexicana de Medicina Transfusional del 2022. Ambos anticuerpos son por lo general de naturaleza IgG, los anti-K pueden ocasionar anemia aplásica debido a que la proteína Kell se expresa en fases muy tempranas del proceso de maduración eritroide. Los anticuerpos anti-Jka son grandes fijadores de complemento, presentan evanescencia y efecto de dosis, de ahí la importancia de ser detectados e identificados de forma correcta y oportuna, ambos anticuerpos pueden producir reacciones hemolíticas inmediatas o tardías. Si bien la donante fue rechazada, es muy importante que tenga conocimiento que es portadora de estos dos anticuerpos, dado que se pueden presentarse dos escenarios: El primero si necesita alguna transfusión de centrado eritrocitario la unidad debe carecer de los antígenos K y Jka  y el segundo, sí desea embarazarse existe el riesgo que el producto desarrolle la enfermedad hemolítica perenal. 

Conclusión

Los anticuerpos detectados fueron el anti-K y el anti-Jka. Esta combinación no es muy común de observar y ambos anticuerpos son de una gran importancia clínica en medicina transfusional. El uso de las técnicas de adsorción y elución dan un apoyo muy importante para la resolución de mezclas de anticuerpos como se ve reflejado en este caso.