​Cómo mitigar la interferencia del uso de anticuerpos monoclonales en los resultados de la inmunofijación

Gráfico 1. Aparición y tipos de terapia con anticuerpos monoclonales

Daratumumab e Isatuximab son anticuerpos monoclonales (mAb) IgG kappa anti-CD38 para el tratamiento de MM recién diagnosticado y recidivante/refractario (RR), capaces de inducir la muerte de células tumorales (apoptosis) pero también efectos inmunomoduladores a través de la eliminación de células inmunosupresoras positivas para CD38, como las células T reguladoras. Gráfico 2

Gráfico 2. Mecanismos de acción de la terapia de Anticuerpos Monoclonales en el MM

El ​Daratumumab está indicado en la terapia de primera línea para la enfermedad de amiloidosis MM y AL.​ El Isatuximab está indicado en 2ª línea de tratamiento del MM en combinación con otros fármacos (pom-dex). ​​Daratumumab es comercializado bajo el nombre Darzalex® e Isatuximab bajo el nombre Sarclisa®

La electroforesis de proteínas séricas (SPE) y la inmunofijación (IF) son pruebas referencia en las directrices del IMWG (Grupo de trabajo internacional sobre mieloma por sus siglas en inglés) para evaluar la respuesta de los pacientes al tratamiento con Mieloma Múltiple.

Daratumumab e isatuximab es un anticuerpo monoclonal que puede detectarse e interferir con la interpretación de la Proteína Monoclonal (Protein M) en las pruebas de electroforesis (CE) e inmunofijación (IF). Gráfico 3

Gráfico 3. Ejemplo de interferencia en la electroforesis de proteínas séricas (SPE)

La monitorización de la Proteína Monoclonal (Protein M) es más difícil en pacientes que responden bien a la terapia y tienen IgG-kappa o FLC-kappa con co-migración con los t-mAb. En esta situación, la banda de proteína M endógena no se puede distinguir de las bandas de t-mAb, resultando en la evaluación incorrecta de la respuesta debido a la interferencia en los ensayos SPE/IF, y por ende, ocasiona una clasificación errónea de acuerdo con las directrices del IMWG (entre muy buena respuesta parcial (VGPR) y respuesta completa (CR)) conduciendo a la subestimación del pronóstico y posible sobretratamiento de pacientes individuales.

La interferencia electroforética se puede superar usando un anticuerpo dirigido al t-mAb para alterar su migración, para el Daratumumab se ha desarrollado el ensayo de desplazamiento denominado HYDRASHIFT/Daratumumab (Sebia), para el Isatuximab se encuentra disponible el ensayo HYDRASHIFT/Isatuximab (Sebia), ambos ensayos son los únicos aprobados por la FDA para mitigar la interferencia de t-mAb.

HYDRASHIFT es altamente recomendado para pacientes con IgG Kappa y/o cadenas ligeras libre Kappa debido a la co-migración con el componente Monoclonal que ocurre en más del 20 % de los casos y permite mediciones de mAb extremadamente sensibles de hasta 1 mg/L.

Su implementación se realiza utilizando instrumentos HYDRASYS 2 Scan (Sebia) y adicionando un anti-anticuerpo contra el Daratumumab o Isatuximab en los carriles IgG y kappa en la IF estándar provocando una migración anódica del medicamento entre las regiones alfa 1 y alfa 2 y permitiendo observar al componente monoclonal del paciente en la parte inferior (entre las regiones beta y gamma) como se muestra a continuación. Gráfico 4

Gráfico 4. Resultado de IF con Hydrashift Isatuximab

El historial de medicación y los estudios séricos originales pueden ayudar a los laboratoristas a interpretar correctamente los resultados de SPE e IF. Sin embargo, si los estudios séricos iniciales que muestran el patrón de migración del clon original del paciente no están disponibles o si la proteína IgGk del paciente migra con el mAb, no se puede inferir si la banda de IgGk visible en la inmunofijación representa el mAb, la Proteína Monoclonal (Protein M) del paciente o la presencia simultánea de ambos anticuerpos monoclonales.

A continuación, se muestra un caso en que la Proteína Monoclonal (Protein M) comigra con el mAb y cómo el Hydrashift elimina la interferencia, lo que permite al médico tratante una correcta evaluación del tratamiento. Gráfico 5.

Gráfico 5. Uso del Hydrashift para eliminar interferencias

Paciente diagnosticado con IgG kappa bajo que inicia su tratamiento con Isatuximab



En conclusión, la evaluación de la respuesta con el diagnóstico electroforético de Proteína Monoclonal (protein M) será cada vez más difícil cuando los pacientes con MM sean tratados con una combinación de t-mAbs, una estrategia que se explora en múltiples estudios clínicos. Es importante que el especialista de laboratorio esté informado sobre el uso de cualquier anticuerpo monoclonal (mAb) para ofrecer al médico tratante un resultado fiable y exacto.